操作室厭氧環(huán)境形成
1)按使用要求放置好必要的配件和器具、并向操作室內(nèi)放入兩個無毒塑料袋。
2)混合氣瓶、氮氣瓶輸入壓力調(diào)整,調(diào)節(jié)減壓閥,使輸入壓力為0.1Mpa
3) 打開設(shè)備后配,電源開關(guān)后,按控制牌上的總電源鍵,使設(shè)備通電。
4)操作室放入1000g鈀粒(密封),由冷凝系統(tǒng)除濕,并放入?yún)捬踔甘緞?/span>
5)關(guān)緊取樣室內(nèi)外門,并抽真空校驗。(按控制面牌上真空泵鍵,按一下開,再按一下關(guān))
6)操作室內(nèi)次置換(氮氣置換):
(1)先用橡皮管插入操作室內(nèi)進氣口,另一個插入塑料袋。
(2)接通氮氣進氣路,打開操作室氮氣控制閥,使兩只塑料袋充足氮氣后,關(guān)閉電磁閥,然后扎緊袋口。
(3)把乳膠手套套在觀察板法蘭圈上并扎緊。
(4)把塑料袋內(nèi)氮氣漸漸的放于操作室內(nèi),至全部防除。
7)操作室第二次置換(氮氣置換)重復一次沖氮過程,取樣室先抽真空,并注意隨時按排氣閥關(guān)閉排氣。
8)操作室第三次置換(混合氣體置換) (混合氣體配比為H2 1/85% H2 1/10% H2 1/10% CO2/15%)
(1)調(diào)換氣路打開操作室混合氣閥進氣,沖氣時取樣室先抽真空,并注意隨時按排氣閥關(guān)閉排氣。
(2)混合氣充滿塑料袋后,關(guān)閉電磁閥,并打開混合氣限流閥,使混合氣經(jīng)過穩(wěn)流器、流量計、調(diào)整流量計,流量為每分鐘10毫升左右。
(3)把塑料袋內(nèi)混合氣漸漸排于操作室內(nèi)。
(4)通過三次換氣后,操作室內(nèi)氣體含氧量已處于極為量狀態(tài)
9)操作室內(nèi)打開鈀粒除氧劑,接通除氧催化器電源進行催化除氧,并在厭氧指示條反應區(qū)上滴一點潔凈水,1-2小時后,觀察其變色情況,反應部分深藍色變?yōu)闇\藍為操作室內(nèi)達到厭氧環(huán)境。
10)紫外線滅菌燈,室內(nèi)進行滅菌處理,滅菌時間自定。
菌種的置入和培養(yǎng)
1)檢查取樣室內(nèi)門并關(guān)緊之。
2)打開取樣室外門,將菌種放入取樣室后即關(guān)上外們。
3)取樣室充氮置換三次過程,先抽真空度500毫米汞柱(66Kpa)以上停,然后打開取樣室氧氣閥進氣,使指針回復零位,關(guān)掉閥。取樣室充氮置換三次過程結(jié)束。
4)如選定真空度較低就需要增加置換的次數(shù)。
5)取樣室外門開啟、關(guān)緊后,再抽低真空度100毫米汞柱(13Kpa)檢驗。
6)厭氧培養(yǎng)箱需要長期連續(xù)使用的條件
(1)每天在操作室內(nèi)放入美蘭指示條觀察,如不能正常就必須重新?lián)Q氣。
(2)要長期連續(xù)輸入微量的混合氣體。使補進的氮氣能和微量的氮結(jié)合通過催化吸收,保證了室內(nèi)厭氧狀態(tài),補入混合氣流量選定為每分鐘10毫升左右。
(3).連續(xù)培養(yǎng)運行一天,更換一次除氧劑和干燥劑。(換下的除氧劑和干燥劑可放在200℃干燥箱內(nèi),干燥2-3小時可使其復原)
7)接種棒滅菌器的應用:
(1)隨時用鎳烙電熱絲使電極短路而變赤熱以進行殺菌(接種棒)。
(2)熔蠟處可直接放上試管封蠟口旋轉(zhuǎn)熔蠟。
8)操作室理的培養(yǎng)箱理的培養(yǎng)箱內(nèi)的溫度可任意選擇和控制。